Die Sensorkinase KdpD aus Escherichia coli: Funktionelle Reinigung, Nukleotidbindestudien und in vivo Protein-Protein Interaktionen
Please use this identifier to cite or link to this item:
https://osnadocs.ub.uni-osnabrueck.de/handle/urn:nbn:de:gbv:700-2012051010154
https://osnadocs.ub.uni-osnabrueck.de/handle/urn:nbn:de:gbv:700-2012051010154
Title: | Die Sensorkinase KdpD aus Escherichia coli: Funktionelle Reinigung, Nukleotidbindestudien und in vivo Protein-Protein Interaktionen |
Authors: | Kipschull, Kerstin |
Thesis advisor: | Prof. Dr. Karlheinz Altendorf |
Thesis referee: | Prof. Dr. Gottfried Unden |
Abstract: | Die membrangebundene Sensorkinase KdpD und der cytoplasmatische Antwortregulator KdpE regulieren die Expression des kdpFABC-Operons, welches für das hoch affine Kaliumaufnahmesystem KdpFABC von Escherichia coli kodiert. Aktiviert wird die Signal-transduktionskaskade zum einen durch Kalium limitierende Bedingungen im Medium und zum anderen aber weniger stark durch erhöhte Osmolarität.Im ersten Teil dieser Arbeit wurde mittels dem "Bacterial Two Hybrid" System nach bisher unbekannten Interaktionspartnern der Sensorkinase KdpD gesucht, die einen Einfluss auf die Regulation des Zweikomponenten-systems haben könnten.Der zweite Teil dieser Arbeit befasst sich mit biochemischen Untersuchungen der Sensorkinase.Neben der Etablierung der kdpD-Expression in Lactococcus lactis, wurde ein neues Reinigungsprotokoll für KdpD erstellt. Das gereinigte KdpD konnte im Anschluss rekonstituiert werden. Kinase-Aktivitätstests zeigten, dass das Protein innerhalb der Membran aktiv ist, wogegen das solubilisierte Protein nur in oligomeren Zuständen vorkommt und kaum aktiv zu sein scheint. Mittels spektroskopischer Messungen wurde außerdem die ATP-Bindung an KdpD untersucht. |
URL: | https://osnadocs.ub.uni-osnabrueck.de/handle/urn:nbn:de:gbv:700-2012051010154 |
Subject Keywords: | Sensorkinase; Escherichia coli; Proteinreinigung; Kalium |
Issue Date: | 10-May-2012 |
Type of publication: | Dissertation oder Habilitation [doctoralThesis] |
Appears in Collections: | FB05 - E-Dissertationen |
Files in This Item:
File | Description | Size | Format | |
---|---|---|---|---|
thesis_kipschull.pdf | Präsentationsformat | 3,52 MB | Adobe PDF | thesis_kipschull.pdf View/Open |
Items in osnaDocs repository are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated. rightsstatements.org